Praktikum Toksikologi (dalam kelompok praktikum Farmakologi )
TUJUAN:
-
Mahasiswa akan memperoleh gambaran cara merancang
percobaan untuk mendapatkan nilai ED50 sebagai model dari percobaan
LD50
-
Mahasiswa memahami konsep indeks terapi (TI) dan cara
penerapannya
1. Penetapan nilai efektif dosis 50 (ED50)
-
Hewan coba:
o
Jumlah hewan minimal 4 ekor tiap sub kelompok
o
Jumlah kelompok minimal 4 sub kelompok
o
Jenis kelamin sama (jantan saja/ betina saja)
o
Bobot badan seragam
-
Dosis obat/bahan kimia peningkatannya merupakan
kelipatan biometric
-
Jumlah hewan yang menunjukan respon yang diharapkan
dicatat:
o
Waktu terjadinya eksitasi
o
Waktu terjadinya hypnosis
o
Denyut jantung sebelum dan sesudah perlakuan
(hypnosis)
-
Kumpulan jumlah hewan yang menunjukkan respon dari
semua kelompok disebut r-values (nilai
r)
-
Dari nilai r dapat dicatat nilai f dan δf (Tabel r)
Untuk
menghitung ED50 dengan rumus:
Log ED50=log
D + d(f+1)
2log m=2d.δf
Sebaran
nilai ED50:
Log ED50
± 2log m
Keterangan:
D = dosis
terkecil yang digunakan
d =
logaritma kelipatan dosis
f =
factor (dalam tabel r)
df =
dicari dalam tabel r
Bahan dan alat:
1. Bahan:
-
urethan dosis maksimum 1,8g/Kg, dengan pemberian dosis
kelipatan 2:
o
dosis I: 225 mg/Kg
o
dosis II: 450 mg/Kg
o
dosis III: 900 mg/Kg
o
dosis IV: 1800 mg/Kg
-
mencit 16 ekor / untuk 4 kelompok, tiap subkelompok 4
ekor:
o
Kelompok I: sub kelompok 1,2,3 dan 4
o
Kelompok II: sub kelompok 5,6,7 dan 8
2.
Timbang mencit dan tandai dengan nomor 1-4 untuk setiap
sub kelompok
3.
hitung volume larutan penyuntikan dengan bobot mencit
-
injeksikan secara ip
4.
Amati perilaku hewan
-
amati terjadinya reaksi (respon) dari penyuntikan
(waktunya):
o
waktu eksitasi
o
waktu hypnosis
o
hitung denyut jantung tiap perlakuan sebelum dan
sesudah penyuntikan
5.
Buat sebuah tabel dan hitung dari ED50 obat
tersebut menurut responsnya
6.
Bila terjadi eksitasi atau hipnosis pada dosis III dan
IV bedakan apakah perbedaan waktu itu nyata atau tidak dengan uji Student’s
t-test (n=4), dari kelompok I dan II.
Tabel 1.
terjadi respon (1) atau tidak terjadinya respon(0) eksitasi atau hipnosis pada mencit yang diberi urethan serta waktu
terjadinya respon
|
Dosis (mg/Kg)
|
Waktu respon eksitasi
|
1 / 0
|
Waktu respon hipnosis
|
1 / 0
|
|
225
|
|
|
|
|
|
450
|
|
|
|
|
|
900
|
|
|
|
|
|
1800
|
|
|
|
|
Tabel 2.
frekwensi denyut jantung (x/mn) sebelum dan sesudah injeksi urethan ip (setelah
hypnosis, sekitar 5 menit setelah
injeksi)
|
Dosis (mg/Kg)
|
Sebelum injeksi
|
Setelah injeksi
|
keterangan
|
|
225
|
|
|
|
|
450
|
|
|
|
|
900
|
|
|
|
|
1800
|
|
|
|
Respon: eksitasi
Kelompok:…….., sub
kelompok:…,….,….,……
|
Dosis urethan(mg/Kg)
|
Respon
|
Nilai r
|
|||
|
Subkelompok
(1)(5)
|
Subkelompok
(2)(6)
|
Subkelompok
(3)(7)
|
Subkelompok
(4)(8)
|
||
|
225
|
|
|
|
|
|
|
450
|
|
|
|
|
|
|
900
|
|
|
|
|
|
|
1800
|
|
|
|
|
|
|
Nilai f
|
|
||||
|
Delta f
|
|
||||
Respon: paralysis/hypnosis
Kelompok:…….., sub
kelompok:…,….,….,……
|
Dosis urethan(mg/Kg)
|
Respon
|
Nilai r
|
|||
|
Subkelompok
(1)(5)
|
Subkelompok
(2)(6)
|
Subkelompok
(3)(7)
|
Subkelompok
(4)(8)
|
||
|
225
|
|
|
|
|
|
|
450
|
|
|
|
|
|
|
900
|
|
|
|
|
|
|
1800
|
|
|
|
|
|
|
Nilai f
|
|
||||
|
Delta f
|
|
||||
Hasil dan pembahasan:
1.
hitung nilai Ed50 pada masing-masing respon
2.
Hitung beda nyata (waktu respon) pada tiap dosis
pemberian dengan uji statistik
3.
Hitung beda nyata denyut jantung/menit sebelum dan
sesudah pemberian obat untuk setiap kelompok perlakuan
4.
Bagaimana kesimpulan anda ?, diskusikan dengan kelompok
masing-masing !!
Nilai r dari jumlah hewan
yang merespons(ED) atau jumlah hewan yang mati (LD) pada masing-masing
kelompok, dengan nilai f dan delta f, n=4; k=3.
|
Nilai r
|
f
|
delta f
|
Nilai r
|
f
|
delta f
|
|
0,0,2,4
0,0,3,4
0,0,4,4
0,1,1,4
0,1,2,4
0,1,3,4
0,1,4,4
0,2,2,4
0,2,3,4
0,2,4,4
0,3,3,4
1,0,2,4
1,0,3,4
1,0,4,4
1,1,1,4
1,1,2,4
1,1,3,4
1,1,4,4
1,2,2,4
1,2,3,4
2,0,2,4
2,0,3,4
2,0,4,4
2,1,1,4
2,1,2,4
2,1,3,4
2,2,2,4
3,0,2,4
3,0,3,4
3,1,1,4
3,1,2,4
0,0,3,3
0,0,4,3
0,1,2,3
|
1,00000
0,75000
0,50000
1,00000
0,75000
0,50000
0,25000
0,50000
0,25000
0,00000
0,00000
1,00000
0.66667
0,33333
1,00000
0,66667
0,33333
0,00000
0,33333
0,00000
1,00000
0,50000
0,00000
1,00000
0,50000
0,00000
0,00000
1,00000
0,00000
1,00000
0,00000
1,00000
0,66667
1,00000
|
0,28868
0,25000
0,00000
0,35355
0,38188
0,35355
0,25000
0,40825
0,38188
0,28868
0,35355
0,38490
0,35136
0,22222
0,47140
0,52116
0,52116
0,47140
0,58794
0,60854
0,57735
0,57735
0,57735
0,70711
0,81650
0,91287
1,00000
1,15470
1,42421
1,41421
1,82574
0,47140
0,22222
0,60858
|
0,1,3,3
0,1,4,3
0,2,2,3
0,2,3,3
0,2,4,3
0,3,3,3
1,0,3,3
1,0,4,3
1,1,2,3
1,1,3,3
1,1,4,3
1,2,2,3
1,2,3,3
2,0,3,3
2,0,4,3
2,1,2,3
2,1,3,3
2,2,2,3
0,0,4,2
0,1,3,2
0,1,4,2
0,2,2,2
0,2,3,2
0,2,4,2
0,3,3,2
1,0,4,2
1,1,3,2
1,1,4,2
1,2,2,2
1,2,3,2
0,2,3,1
0,2,4,1
0,3,3,1
0,1,4,1
|
0,66667
0,33333
0.66667
0,33333
0,00000
0,00000
1,00000
0,50000
1,00000
0,50000
0,00000
0,50000
0,00000
1,00000
0,00000
1,00000
0,00000
0,00000
1,00000
1,00000
0,50000
1,00000
0,50000
0,00000
0,00000
1,00000
1,00000
0,00000
1,00000
0,00000
1,00000
0,00000
0,00000
1,00000
|
0,52116
0,35136
0,58794
0,52116
0,38490
0,47140
0,70711
0,35355
0,91287
0,79057
0,70711
0,88976
0,91287
1,41421
1,15470
1,82574
1,82574
2,00000
0,57735
0,91287
0,57735
1,00000
0,81650
0,57735
0,70711
1,15470
1,82574
1,41421
2,00000
1,82574
1,82574
1,15470
1,41421
1,41421
|
Biometric,1952
Perbandingan luas permukaan tubuh hewan percobaan untuk
konversi dosis
|
|
20g mencit
|
200g tikus
|
400g marmot
|
1,5Kg kelinci
|
2,0Kg kucing
|
4,0Kg kera
|
12,0Kg anjing
|
70Kg manusia
|
|
20g mencit
|
1,0
|
7,0
|
12,29
|
27,8
|
29,7
|
64,1
|
124,2
|
387,9
|
|
200g tikus
|
0,14
|
1,0
|
1,74
|
3,3
|
4,2
|
9,2
|
17,8
|
56,0
|
|
400g marmot
|
0,08
|
0,57
|
1,0
|
2,25
|
2,4
|
5,2
|
10,2
|
31,5
|
|
1,5Kg kelinci
|
0,04
|
0,25
|
0,44
|
1,0
|
1,06
|
2,4
|
4,5
|
14,2
|
|
2,0Kg kucing
|
0,03
|
0,23
|
0,42
|
0,92
|
1,0
|
2,2
|
4,1
|
13,0
|
|
4,0Kg kera
|
0,016
|
0,11
|
0,19
|
0,42
|
0,45
|
1,0
|
1,9
|
6,1
|
|
12,0Kg anjing
|
0,008
|
0,06
|
0,10
|
0,022
|
0,24
|
0,52
|
1,0
|
3,1
|
|
70Kg manusia
|
0,0026
|
0,018
|
0,031
|
0,07
|
0,013
|
0,16
|
0,32
|
1,0
|
0 Response to "Praktikum Toksikologi (dalam kelompok praktikum Farmakologi )"
Post a Comment